Выбор пробирок и флаконов

Химическая совместимость

В первую очередь следует помнить о необходимости химической совместимости материала пробирки со средами для формирования градиента или иными растворителями.

  • Нейтральные растворы сахарозы и соли, как правило, не вызывают проблем
  • Щелочные растворы, которые, например, применяются для разделения одноцепочечных форм ДНК, не следует использовать с пробирками Ultra-Clear™ или пробирками и флаконами из поликарбоната
  • Если для подготовки градиентов сахарозы для осаждения денатурированной РНК используется ДМСО (диметилсульфоксид), операторы должны использовать полиаломерные пробирки.

Рекомендуется всегда проверять любые сомнительные материалы/комбинацию материалов в рабочих условиях до фактического запуска. Такие условия, как центробежное ускорение, длительность пробега и т. д., могут существенно влиять на то, как материал, из которого изготовлена пробирка будет работать/выдерживать определенный растворитель.

Клиницист, изучающий химические вещества

Типы проб могут влиять на материал пробирки по-разному

  • Одноцепочечная или денатурированная ДНК будет прилипать к поверхности некоторых материалов, из которых изготовлена пробирка, требуя применения полиалломерной пробирки, поскольку большая часть этой работы выполняется в высокощелочных средах, несовместимых с поликарбонатом
  • Разделение липопротеинов обычно проводят в сверхчистых и разрезаемых пробирках Ultra-Clear для упрощения определения местоположения и восстановления фракций
  • Пробирки из пропионата целлюлозы, поликарбоната или пробирки Ultra-Clear могут также использоваться при извлечении небольших образцов липопротеинов с помощью фракционирующего устройства

Опасные материалы

Будьте предельно осторожны при центрифугировании патогенных или радиоактивных опасных материалов. Необходимо принять все возможные меры предосторожности, препятствующие любым утечкам в полость ротора во время центрифугирования.

Формирование градиента и фракционирование

При выборе пробирки для цикла с градиентом плотности, следует учитывать ряд рекомендаций, связанных с формированием градиента и фракционированием.

  • Если оптимальная визуализация полос важна, следует использовать пробирки из пропионата целлюлозы, поликарбоната или пробирки Ultra-Clear 
  • Всякий раз, когда сбор материала полос или зон выполняется пунктированием или разрезанием пробирки, требуется пробирка с тонкими мягкими стенками
  • Во избежание смешивания градиенты необходимо загружать в пластиковые пробирки снизу вверх

Центрифугирование при высокой температуре

Хотя современные центрифуги и роторы могут работать при температурах до 45°C, нецелесообразно предполагать, что каждую пробирку можно безопасно использовать при температуре выше 25°C.

  • Нержавеющая сталь и стекло являются единственными материалами, которые не деформируются/не деградируют при высоких температурах и длительном времени центрифугирования
  • Пластиковые пробирки подвергаются некоторой степени размягчения при температуре выше 25°C. Принимайте во внимание центробежную силу, длительность обработки, тип ротора и даже угол наклона пробирки; пробирка может деформироваться
  • Рекомендуется предварительно протестировать в реальных экспериментальных условиях пробирки с водой для определения любого потенциально отрицательного результата

Размеры пробирок

Размеры пробирок, указанные в следующих таблицах, являются номинальными и могут, в определенной степени, отличаться от фактической вместимости. При использовании толстостенной пробирки без крышки максимальный объем заполнения будет зависеть от угла размещения пробирки. См. руководство по эксплуатации ротора для получения подробной информации о максимальных уровнях наполнения трубок.

Очистка

При очистке и стерилизации многоразовых пробирок следует соблюдать особую осторожность.

  • Все пробирки следует мыть вручную, используя слабый раствор моющего средства, например, Solution 555™, разбавленный водой в соотношении 5:1 или 10:1.  Запрещается мыть трубки или бутылки в промышленных посудомоечных машинах.
  • Пробирки и флаконы из поликарбоната не должны подвергаться воздействию моющих средств с уровнем рН выше 8.
  • Если во время процедуры очистки необходимо использовать органический растворитель, такой как спирт или ацетон, ознакомьтесь с руководством по химической стойкости пробирок и флаконов компании Beckman Coulter для получения подробной информации о материалах, из которых изготовлены пробирки, и их совместимость с растворителями.

Стерилизация

  • Метод стерилизации оказывает непосредственное влияние на количество повторных использований пробирки
  • Пробирки и флаконы из полиалломера, полиэтилена и стекла могут подвергаться автоклавированию.  ПРИМЕЧАНИЕ: холодная стерилизация является менее жесткой и рекомендуется для пробирок и флаконов из поликарбоната и пробирок и флаконов Ultra-Clear
  • Пробирки, флаконы и принадлежности необходимо всегда высушивать.  Никогда не используйте печь для сушки лабораторного оборудования или других принадлежностей для удержания веществ. 
  • Пробирки OptiSeal, Quick-Seal, Ultra Clear и тонкостенные пробирки из полиалломера являются одноразовыми и подлежат утилизации после использования

Повторное использование

  • Если основным соображением при выборе посуды является повторное использование, следует выбирать пробирки и флаконы либо из полиалломера (предпочтительно, толстостенного), либо из поликарбоната, а также использовать методы холодной стерилизации
  • Такие пробирки при полном заполнении бакет-роторов используются многоразово
  • Возможность необратимой деформации будет возрастать всякий раз при использовании частично заполненных пробирок, пробирок без колпачков или в угловых роторах
  • Ранее использованные или автоклавированные пробирки должны всегда проверятся на наличие признаков деформации или растрескивания 

Закупорка и удобство использования пробирок

При удовлетворении всех остальных требований решающим фактором может служить удобство использования. Без сомнения, самая удобная закупорка пробирки — это ее отсутствие. При использовании пробирки в бакет-роторе и микро-ультрацентрифуге с воздушным приводом Airfuge® закупорка не требуется.

Для использования пробирок в угловых роторах имеются альтернативы использованию стандартного сборного колпачка пробирок.

  • Для флаконов используют трехкомпонентные сборные колпачки, они проще в употреблении, чем более сложные сборные колпачки для пробирок 
  • В наличии имеются флаконы из поликарбоната, предназначенные для угловых роторов общего назначения; их часто применяют для дифференциального центрифугирования в тех случаях, когда не возникает затруднений с извлечением материала сформированного слоя
  • Частично заполненные толстостенные пробирки можно использовать без колпачков во всех угловых роторах (для получения информации об объемах заполнения пробирок см. руководство по эксплуатации ротора)

Варианты запечатанных пробирок

Пробирки OptiSeal для запечатывания без лишних усилий

  • Вставьте в пробирку пробку и надавите на нее
  • Уплотнительное кольцо надежно зафиксируется на внутренней поверхности пробирки
  • Во время центрифугирования эффективность уплотнения поддерживается совместным воздействием центробежного ускорения и гидростатического давления
  • Не требует использования инструментов, не содержит механических частей
  • Высокая надежность

Пробирки Quick-Seal сокращают затрачиваемое время вдвое

Куполообразная или трубчатая конструкция предназначена для максимальной гибкости

  • Пробирки заполняются через куполообразное отверстие с входом 3 мм
  • Пробирки запечатываются термическим способом при помощи ручного сварочного устройства
  • Высокая надежность герметизации делает эти пробирки идеальным вариантом для хранения проб и работы с радиоактивными или патогенными материалами

Примечание. Данная информация собрана из ряда источников и представлена исключительно в качестве руководства по выбору материалов, из которых изготавливаются пробирки. В ходе комплексных испытаний при нагрузке 1 г (при температуре 20°C) были установлены данные для большинства материалов; результаты могут меняться в зависимости от напряжения центрифугирования, длительности контакта или разных температур. В целях предотвращения сбоя и потери ценного образца, ПЕРЕД ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВСЕГДА ТЕСТИРУЙТЕ УСТРОЙСТВА В РЕАЛЬНЫХ УСЛОВИЯХ ЭКСПЛУАТАЦИИ.

Внимание! Запрещено использовать воспламеняющиеся вещества внутри или вблизи работающих центрифуг.