Краткий обзор аналитического ультрацентрифугирования

Аналитическое ультрацентрифугирование (AUC) для исследования характеристик макромолекул в растворе

Аналитическое ультрацентрифугирование (AUC) по-прежнему остается самым универсальным, строгим и точным из имеющихся методов определения молекулярной массы белков и других макромолекул, а также их гидро- и термодинамических свойств.

История AUC уходит корнями почти на сто лет назад. Как и век назад главными особенностями метода являются:

  • Базовое, независимое измерение, выполняемое в среде без матриц. Метод не требует стандартов и эталонов.
  • Никакой другой метод не может обеспечить получение такого же объема информации со сравнимым уровнем точности и достоверности.
  • Метод является «золотым стандартом» для определения молекулярной массы белка в растворе2.

Основы AUC: выводы, базирующиеся на скорости и равновесии

В отличие от других методов, используемых для анализа макромолекул, аналитическое ультрацентрифугирование (AUC) позволяет получать характеристики образцов в их нативном состоянии в соответствующих биологических условиях раствора. AUC можно использовать для исследования практически любого типа молекул или частиц в широком диапазоне концентраций и в различных растворителях. Во многих научных исследованиях невозможно найти подходящую замену технологии AUC.1

AUC предоставляет исследователям два взаимодополняющих представления поведения раствора. Скоростная седиментация предоставляет базовую, гидродинамическую информацию о размере и форме молекул. Седиментационное равновесие обеспечивает тот же тип информации о молярной массе раствора, стехиометрических показателях, константах ассоциации и неидеальности раствора.

Больше вопросов? Больше ответов.

В одном эксперименте технология AUC может обеспечить больше ответов на важнейшие вопросы, чем какие-либо другие сопоставимые методы:

  • Форма: Насколько сферичен белок?
  • Диаметр: Каков размер частицы?
  • Масса: Какова молекулярная масса белка или комплекса в растворе?
  • Стехиометрия: Сколько субъединиц содержит белок?
  • Чистота: Есть ли другие частицы в образце?
  • Состав препарата: Как ведет себя белок в данном буфере?
  • Гетерогенность: Привязан ли белок к другим молекулам, и какая конфигурация у данного комплекса?
  • Агрегация: Будет ли исследуемый белок находится в пригодной форме в растворе? Следует ли ожидать иммунной реакции с лекарственным препаратом?
  • Ассоциация: Ассоциируется или диссоциируется исследуемый белок с другими белками?
  • Конформация: Изменяется ли конформация исследуемого белка при связывании с лигандом?

Узнайте еще больше о технологии AUC в нашем справочнике Введение в аналитическое ультрацентрифугирование.

Справочные материалы:

1 Cole JL, Lary JW, Moody T, et al. Analytical Ultracentrifugation: Sedimentation Velocity and Sedimentation Equilibrium. Methods Cell Biol 2008;84:143–79.

2 Berkowitz S, Philo J. Characterizing Biopharmaceuticals using Analytical Ultracentrifugation. Источник: Houde D, Berkowitz S, editors. Biophysical Characterization of Proteins in Developing Biopharmaceuticals. Amsterdam: Elsevier; 2015. p. 211-260.

Ресурсы

Title Description
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{749D68FB-4893-4B2D-BD6C-C662F0520F64}
{442DF88C-CA7F-4B78-AF75-9D2B985534C0}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}|{8ED0B7A0-4EDF-41AC-9D0B-3950E79F42E4}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}
{FBC52A26-B43E-46C3-A091-65AAEFBE5885}
{A7DF4F56-8AF9-4BF1-88BE-766AB73FBC6B}
{A7DF4F56-8AF9-4BF1-88BE-766AB73FBC6B}
{9E29D7A5-B5EC-470A-A5C1-4EF9BFAE9959}
{9E29D7A5-B5EC-470A-A5C1-4EF9BFAE9959}
{9E29D7A5-B5EC-470A-A5C1-4EF9BFAE9959}
{3AB28F00-B7FC-47D9-80F2-C0E49A388F7B}
{3AB28F00-B7FC-47D9-80F2-C0E49A388F7B}
{611E05FD-FC41-4E23-9498-DA5662F8D4F9}
{C00ACFAF-8661-4DF6-8BA5-A7A099A7BA9C}
{C00ACFAF-8661-4DF6-8BA5-A7A099A7BA9C}

Что такое аналитическая ультрацентрифуга?

Optima AUCАналитическая ультрацентрифуга во многом схожа с высокоскоростной препаративной центрифугой. Отличие аналитических ультрацентрифуг заключается в том, что они оснащены оптическими системами для детекции седиментации частиц в реальном времени. Эти оптические системы (поглощение в ультрафиолетовой и видимой области спектра и интерференция Рэлея) позволяют точно отследить поведение молекул в растворе в процессе седиментации. С помощью современного программного обеспечения, полученные данные могут использоваться для проведения всестороннего анализа молекул в исследуемом образце.

Свяжитесь с нами

















Я согласен получать информацию о продукции, вебинарах, товарах и услугах компании Beckman Coulter, включая также информацию о продукции, товарах и услугах аффилированных компаний.



Добровольно предоставляя нам свои персональные данные с целью рассылки информации рекламного характера, вы соглашаетесь с тем, что в силу специфики Интернета, ваши данные могут быть переданы за пределы границ Российской Федерации. Настоящим вы признаете и соглашаетесь, что такие персональные данные могут быть переданы из места вашего действительного нахождения в офисы и на серверы Beckman Coulter Inc., ее аффилированных лиц, агентов и поставщиков услуг, которые могут находиться в Европейском Союзе, Соединенных Штатах Америки и других странах. В случае передачи данных в страну, чьи законы, применимые к осуществляемым на Сайте операциям, не обеспечивают эквивалентную защиту данных, Beckman Coulter Inc. предпримет все меры, чтобы обеспечить надлежащий уровень защиты таких персональных данных в соответствии с настоящим согласием. Ознакомьтесь с нашей политикой конфиденциальности и политикой в отношении персональных данных.