Оптимизированный протокол анализа клеточного цикла

PerFix-nc Buffer R1 – это реагент, основанный на формальдегиде, который используется для бережной фиксации клеток при комнатной температуре. После фиксации клетки отмывают два раза, чтобы убрать избыток формальдегида.

Пермеабилизация и одновременное окрашивание ДНК и специфических белков происходит за один этап. Для этого антитела к специфическим белкам добавляеются к реагенту Cell Cycle Kit, который также содержит в своем составе РНКазу А, предотвращающую окрашивание РНК йодидом пропидия.

После окрашивания дополнительных отмывок не требуется. Образец готов к анализу на цитометре после инкубации в течение 15 минут. Этот оптимизированный протокол анализа клеточного цикла уменьшает количество ручных операций с 11 до 7 и снижает время ожидания на 50%. Отсутствие необходимости отмывать клетки после окрашивания также снижает потерю клеток, что может быть важно для анализа редких событий.

Сравнение протоколов многопараметрического анализа клеточного цикла

Сравнение протоколов окрашивания для многопараметрического анализа клеточного цикла. Схематическое представление стандартного протокола окрашивания в сравнении с оптимизированным протоколом, в котором используется набор для фиксации PerFix-nc и реагент для анализа клеточного цикла Cell Cycle Kit.